Gélose Hektoen

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La gélose Hektoen est un milieu de culture servant à isoler les Salmonella, Shigella, Yersinia.

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Composition

protéose-peptone :..........................................12,0 g
extrait de levure : facteur de croissance..................3,0 g
lactose : critère de différenciation.......................12,0 g
saccharose : critère de différenciation....................12,0 g
salicine : critère de différenciation......................2,0 g
citrate de fer III et d'ammonium révélateur d'H2S..........1,5 g
sels biliaires : inhibiteur................................9,0 g
fuchsine acide : inhibiteur................................0,1 g
bleu de bromothymol : indicateur de pH.....................0,065 g
chlorure de sodium : maintien de la pression osmotique.....5,0 g
thiosulfate de sodium : précurseur d'H2S...................5,0 g
agar..........................................14,0 g
pH = 7,5 ± 0,2

Préparation

Mélanger 75 g de milieu déshydraté avec un litre d’eau distillée stérile et porter à ébullition. Après refroidissement aux alentours de 50 degrés celcius, le milieu peut-être coulé en boîte ou flacons. Le milieu ne doit pas être autoclavé^[1].

Lecture

Les colonies sont normalement des colonies de bacilles Gram négatif. Les colonies à centre noir sont H₂S +, c'est-à-dire qu'elle produisent de l'H₂S. Les colonies bleues ou vertes n'utilisent aucun des glucides du milieu. Elles sont donc saccharose et salicine et lactose négatives. La couleur bleue peut être due à l'utilisation du citrate. Les colonies jaunes utilisent un ou plusieurs des glucides. Elles sont donc saccharose et/ou lactose et/ou salicine positives. Un précipité de sels biliaires peut apparaître pour les souches acidifiantes.

Colonies jaune saumon : E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, Serratia
Colonies jaune saumon à centre gris : P. vulgaris
Colonies vertes à centre noir : P. mirabilis, Salmonella
Colonies vertes ou bleuâtres : Shigella, Morganella morganii, Providencia
Colonies bleuâtres oxydase+ : Pseudomonas