Wikipédia

Étiquette (biologie)

Page d’aide sur l’homonymie

Pour les articles homonymes, voir Étiquette.

En biologie moléculaire, une étiquette, ou un tag, est une courte séquence d'acides aminés, parfois d'acides nucléiques. Pour ajouter cette étiquette composée d'acides aminés ou nucléiques dans une protéine, on peut par exemple ajouter la séquence nucléotidique correspondante à la séquence d'acides aminés à l'extrémité de la séquence du gène permettant de produire une protéine d'intérêt. Ces séquences sont ajoutées grâce au génie génétique dans le but de détecter la présence de la protéine, ou encore de faciliter sa purification ou sa solubilisation. Lorsqu'il s'agit d'acides nucléiques, ce terme désigne de courtes séquences représentatives d'un gène ou d'un ARN messager, comme les EST, « expressed sequence tag ».

Les étiquettes de chromatographie sont utilisées pour permettre à la protéine de s'accrocher à la résine (la phase stationnaire) d'une chromatographie et ainsi retenir la protéine. Celles-ci consistent souvent en acides aminés polyanioniques[1].

Les épitopes peuvent aussi être utilisés comme des étiquettes : l'ajout d'une étiquette de ce type permet de rendre la protéine d’intérêt immuno-réactive à un anticorps connu. Ce sont des séquences courtes d'acides aminés. Ce procédé permet notamment de localiser les protéines recombinantes in vivo à l'échelle de la cellule et subcellulaire[2]. Ils ont l'avantage de permettre de distinguer la protéine d’intérêt d'autres produits de gènes similaires qui ne peuvent généralement pas être distingués avec des anticorps conventionnels et peu spécifiques[3]. On peut utiliser cette technique dans un procédé de co-immunoprécipitation ce qui permet de précipiter le complexe protéique dont fait partie la protéine taguée pour pouvoir détecter leur présence et les étudier[4]. Il est aussi possible de s'en servir pour les analyses de Western Blot ou l'immunofluorescence[5].

Différents types d'étiquette protéique modifier

Étiquettes d'affinité modifier

Ce sont des étiquettes utilisées pour ajouter à une protéine d'intérêt une partie permettant leur purification par chromatographie d'affinité. Les étiquettes d'affinité les plus utilisées sont His-tag, Glutathion S-transférase (GST) et la maltose binding protein (MBP)[6].

exemples :

  • Étiquettes poly-histidine, pentaHis (5 histidines) ou sixHis (6 histidines) qui sont des peptides chélateurs à haute affinité des cations cobalt et nickel[7].
  • Etiquette FLAG ou FLAG-tag en anglais (DYKDDDK)[8],[9].
  • Glutathion S-transférase (étiquette de nature protéique à 220 acides aminés)[10], cette protéine possède une affinité pour le glutathion, ce qui lui permet de l'immobiliser.
  • maltose binding protein-Tag[11].
  • Calmodulin Binding Peptide[12],[13] (étiquette de 26 acides aminés).
  • Protéine A[14].
  • Spot-tag, petite étiquette de 12 acides aminés[15].
  • Strep-tag, petite étiquette pour les repliements natifs de la protéine d'intérêt[16],[17].
  • CRDSat[6].
  • ABP (grande étiquette de 137 acides aminés) : C'est une protéine de liaison à l'albumine[18] capable d'augmenter la stabilité protéique de la protéine de fusion afin d'augmenter son expression.
  • Alkaline phosphatase (AP)[19](grande étiquette de 444 acides aminés).
  • AviTag, petite étiquette de 15 acides aminés, est un peptide biotinylable (par l'enzyme BirA) permettant la liaison à la streptavidine.
  • AU1 epitope (Monoclonal antibodies) (DTYRYI).
  • AU5 epitope (TDFYLK).
  • T7-tag ou Bacteriophage T7 epitope[18] (MASMTGGQQMG)
  • Biotin-carboxy carrier protein ou BCCP (grande étiquette de 100 acides aminés).
  • Bluetongue virus tag ou B-tag (QYPALT)[20].
  • Cellulose binding domain ou CBP (grande étiquettes pouvant aller de 27 à 189 acides aminés).
  • Chloramphenicol Acetyl Transferase ou CAT (grande étiquette de 218 acides aminés).
  • Chitin binding domain ou CBD (étiquette de 51 acides aminés)[21].
  • Choline binding domain (CBD) (grande étiquette de 145 acides aminés).
  • Glu-Glu ou EE-tag (EYMPME ou EFMPME).
  • Arg-tag (polyarginine)[22].
  • Asp-tag (polyaspartate).
  • Cys-tag (polycystéine)[23].
  • Phe-tag (polyphénilalanine).
  • VSV-G (Vesicular stomatitis virus G glycoprotein)[24].
  • TAP (tandem affinity purification)[25].

Étiquettes de solubilisation modifier

Ce sont des étiquettes permettant d'améliorer la solubilité de certaines protéines recombinantes.

Étiquettes fluorescentes modifier

Les étiquettes fluorescentes sont des séquences protéiques qui peuvent être fusionnées à une protéine d’intérêt pour la rendre fluorescente et permettre sa visualisation in vivo et in vitro[31]. on trouve différentes étiquettes disponibles, y compris les protéines intrinsèquement fluorescentes et les protéines dont la fluorescence dérive de la liaison de fluorophores endogènes ou exogènes. Ils peuvent aussi permettre de mesurer l'abondance d'une protéine dans des cellules. Ces étiquettes, comme la GFP et ses variantes, sont les étiquettes de fluorescence les plus couramment utilisées. Les applications plus avancées de GFP incluent son utilisation en tant que rapporteur de pliage (fluorescent si plié, incolore sinon)[32],[31].

Voir aussi modifier

Articles connexes modifier

(en) Cet article est partiellement ou en totalité issu de la page de Wikipédia en anglais intitulée « Protein tag » (voir la liste des auteurs).

Notes et références modifier

  1. ↑ Muhammad Tehseen, Vlad-Stefan Raducanu, Fahad Rashid et Afnan Shirbini, « Proliferating cell nuclear antigen-agarose column: A tag-free and tag-dependent tool for protein purification affinity chromatography », Journal of Chromatography A, vol. 1602,‎ , p. 341–349 (ISSN 0021-9673, DOI 10.1016/j.chroma.2019.06.008, lire en ligne, consulté le )
  2. ↑ Jonathan W. Jarvik et Cheryl A. Telmer, « Epitope Tagging », Annual Review of Genetics, vol. 32, no 1,‎ , p. 601–618 (PMID 9928493, DOI 10.1146/annurev.genet.32.1.601, lire en ligne, consulté le )
  3. ↑ Christian E. Fritze et Thomas R. Anderson, « Epitope tagging: General method for tracking recombinant proteins », dans Methods in Enzymology, vol. 327, Academic Press, coll. « Applications of Chimeric Genes and Hybrid Proteins - Part B: Cell Biology and Physiology », (lire en ligne), p. 3–16
  4. ↑ (en) « Co-Immunoprecipitation (Co-IP) - US », sur www.thermofisher.com (consulté le )
  5. ↑ Bill Brizzard, « Epitope tagging », BioTechniques, vol. 44, no 5,‎ , p. 693–695 (ISSN 0736-6205, DOI 10.2144/000112841, lire en ligne, consulté le )
  6. ↑ a et b (en) Alexandre Kriznik, Mélissa Yéléhé‐Okouma, Jean-Christophe Lec et Guillaume Groshenry, « CRDSAT Generated by pCARGHO: A New Efficient Lectin-Based Affinity Tag Method for Safe, Simple, and Low-Cost Protein Purification », Biotechnology Journal, vol. 14, no 4,‎ , p. 1800214 (ISSN 1860-7314, DOI 10.1002/biot.201800214, lire en ligne, consulté le )
  7. ↑ Sinéad T. Loughran, Noeleen B. Loughran, Barry J. Ryan et Brendan N. D’Souza, « Modified His-tag fusion vector for enhanced protein purification by immobilized metal affinity chromatography », Analytical Biochemistry, vol. 355, no 1,‎ , p. 148–150 (ISSN 0003-2697, DOI 10.1016/j.ab.2006.05.011, lire en ligne, consulté le )
  8. ↑ Erica Gerace et Danesh Moazed, « Chapter Seven - Affinity Pull-Down of Proteins Using Anti-FLAG M2 Agarose Beads », dans Methods in Enzymology, vol. 559, Academic Press, coll. « Laboratory Methods in Enzymology: Protein Part D », (lire en ligne), p. 99–110
  9. ↑ Lidia N. Gómez-Arribas, Javier L. Urraca, Elena Benito-Peña et María C. Moreno-Bondi, « Tag-Specific Affinity Purification of Recombinant Proteins by Using Molecularly Imprinted Polymers », Analytical Chemistry, vol. 91, no 6,‎ , p. 4100–4106 (ISSN 0003-2700, DOI 10.1021/acs.analchem.8b05731, lire en ligne, consulté le )
  10. ↑ Frank Schäfer, Nicole Seip, Barbara Maertens et Helena Block, « Chapter Nine - Purification of GST-Tagged Proteins », dans Methods in Enzymology, vol. 559, Academic Press, coll. « Laboratory Methods in Enzymology: Protein Part D », (lire en ligne), p. 127–139
  11. ↑ a et b (en) Mario Lebendiker et Tsafi Danieli, Protein Chromatography, Dermot WallsSinéad T. Loughran, , 527 p. (ISBN 978-1-60761-912-3, ISSN 1064-3745, e-ISSN 1940-6029, lire en ligne), « Purification of Proteins Fused to Maltose-Binding Protein », p. 281-293
  12. ↑ Michelle E. Kimple, Allison L. Brill et Renee L. Pasker, « Overview of Affinity Tags for Protein Purification », Current protocols in protein science / editorial board, John E. Coligan ... [et al.], vol. 73,‎ , Unit–9.9 (ISSN 1934-3655, PMID 24510596, PMCID 4527311, DOI 10.1002/0471140864.ps0909s73, lire en ligne, consulté le )
  13. ↑ (en) Wolfgang Klein, « Calmodulin-Binding Peptide as a Removable Affinity Tag for Protein Purification », dans E. coliGene Expression Protocols, Humana Press, coll. « Methods in Molecular Biology™ », (ISBN 9781592593019, DOI 10.1385/1-59259-301-1:79, lire en ligne), p. 79–97
  14. ↑ (en) Garshasb Rigi, Samira Ghaedmohammadi et Gholamreza Ahmadian, « A comprehensive review on staphylococcal protein A (SpA): Its production and applications », Biotechnology and Applied Biochemistry, vol. 66, no 3,‎ , p. 454–464 (ISSN 1470-8744, DOI 10.1002/bab.1742, lire en ligne, consulté le )
  15. ↑ (en) « chromotek »
  16. ↑ « Protein Purification with Strep-Tactin® | IBA Lifesciences », sur www.iba-lifesciences.com (consulté le )
  17. ↑ (en) Thomas GM Schmidt et Arne Skerra, « The Strep -tag system for one-step purification and high-affinity detection or capturing of proteins », Nature Protocols, vol. 2, no 6,‎ , p. 1528–1535 (ISSN 1750-2799, DOI 10.1038/nprot.2007.209, lire en ligne, consulté le )
  18. ↑ a b et c Michelle E. Kimple, Allison L. Brill et Renee L. Pasker, « Overview of Affinity Tags for Protein Purification », Current protocols in protein science / editorial board, John E. Coligan ... [et al.], vol. 73,‎ , Unit–9.9 (ISSN 1934-3655, PMID 24510596, PMCID 4527311, DOI 10.1002/0471140864.ps0909s73, lire en ligne, consulté le )
  19. ↑ Abril Gijsbers, Takuya Nishigaki et Nuria Sánchez-Puig, « Fluorescence Anisotropy as a Tool to Study Protein-protein Interactions », Journal of Visualized Experiments : JoVE, no 116,‎ (ISSN 1940-087X, PMID 27805607, PMCID 5092215, DOI 10.3791/54640, lire en ligne, consulté le )
  20. ↑ Karam Chand, Sanchay K. Biswas et Bimalendu Mondal, « Purification of infective bluetongue virus particles by immuno-affinity chromatography using anti-core antibody », VirusDisease, vol. 27, no 1,‎ , p. 98–101 (ISSN 2347-3584, PMID 26925450, PMCID 4758307, DOI 10.1007/s13337-015-0298-0, lire en ligne, consulté le )
  21. ↑ Sarah F. Mitchell et Jon R. Lorsch, « Chapter Eight - Protein Affinity Purification using Intein/Chitin Binding Protein Tags », dans Methods in Enzymology, vol. 559, Academic Press, coll. « Laboratory Methods in Enzymology: Protein Part D », (lire en ligne), p. 111–125
  22. ↑ (en) « Reversible, site-specific immobilization of polyarginine-tagged fusion proteins on mica surfaces », FEBS Letters, vol. 414, no 2,‎ , p. 233–238 (ISSN 1873-3468, DOI 10.1016/S0014-5793(97)01040-5, lire en ligne, consulté le )
  23. ↑ Marina V. Backer, Vimal Patel, Brian T. Jehning et Kevin P. Claffey, « Surface immobilization of active vascular endothelial growth factor via a cysteine-containing tag », Biomaterials, vol. 27, no 31,‎ , p. 5452–5458 (ISSN 0142-9612, DOI 10.1016/j.biomaterials.2006.06.025, lire en ligne, consulté le )
  24. ↑ « JMB :: Journal of Microbiology and Biotechnology », sur www.jmb.or.kr (DOI 10.4014/jmb.1611.11082, consulté le )
  25. ↑ Oscar Puig, Friederike Caspary, Guillaume Rigaut et Berthold Rutz, « The Tandem Affinity Purification (TAP) Method: A General Procedure of Protein Complex Purification », Methods, vol. 24, no 3,‎ , p. 218–229 (ISSN 1046-2023, DOI 10.1006/meth.2001.1183, lire en ligne, consulté le )
  26. ↑ Anne-Sophie BOHRER, Caractérisation biochimique et fonctionnelled’une nouvelle thiorédoxine plastidiale (TRX z)d’Arabidopsis thaliana
  27. ↑ David Oyen, Jonathan L. Torres, Ulrike Wille-Reece et Christian F. Ockenhouse, « Structural basis for antibody recognition of the NANP repeats in Plasmodium falciparum circumsporozoite protein », Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, vol. 114, no 48,‎ , E10438–E10445 (ISSN 0027-8424, PMID 29138320, PMCID 5715787, DOI 10.1073/pnas.1715812114, lire en ligne, consulté le )
  28. ↑ Yong Chen, Shuang Li, Tingjian Chen et Hui Hua, « Random dissection to select for protein split sites and its application in protein fragment complementation », Protein Science : A Publication of the Protein Society, vol. 18, no 2,‎ , p. 399–409 (ISSN 0961-8368, PMID 19165722, PMCID 2708047, DOI 10.1002/pro.42, lire en ligne, consulté le )
  29. ↑ Sándor Varga, Ganesh Ramnath Pathare, Erzsébet Baka et Marius Boicu, « Enhancing recombinant protein solubility with ubiquitin-like small archeal modifying protein fusion partners », Journal of Microbiological Methods, vol. 118,‎ , p. 113–122 (ISSN 0167-7012, DOI 10.1016/j.mimet.2015.08.017, lire en ligne, consulté le )
  30. ↑ (en) Dennis Kuo, Minghua Nie et Albert J. Courey, « SUMO as a Solubility Tag and In Vivo Cleavage of SUMO Fusion Proteins with Ulp1 », dans Protein Affinity Tags: Methods and Protocols, Springer New York, coll. « Methods in Molecular Biology », (ISBN 9781493910342, DOI 10.1007/978-1-4939-1034-2_6, lire en ligne), p. 71–80
  31. ↑ a et b Kurt Thorn, « Genetically encoded fluorescent tags », Molecular Biology of the Cell, vol. 28, no 7,‎ , p. 848–857 (ISSN 1059-1524, PMID 28360214, PMCID 5385933, DOI 10.1091/mbc.E16-07-0504, lire en ligne, consulté le )
  32. ↑ Abril Gijsbers, Takuya Nishigaki et Nuria Sánchez-Puig, « Fluorescence Anisotropy as a Tool to Study Protein-protein Interactions », Journal of Visualized Experiments : JoVE, no 116,‎ (ISSN 1940-087X, PMID 27805607, PMCID 5092215, DOI 10.3791/54640, lire en ligne, consulté le )
  33. ↑ (en) Julia Dyachok, J. Alan Sparks, Fuqi Liao et Yuh-Shuh Wang, « Fluorescent protein-based reporters of the actin cytoskeleton in living plant cells: Fluorophore variant, actin binding domain, and promoter considerations », Cytoskeleton, vol. 71, no 5,‎ , p. 311–327 (ISSN 1949-3592, DOI 10.1002/cm.21174, lire en ligne, consulté le )
  34. ↑ Stephen R. Adams et Roger Y. Tsien, « Preparation of the membrane-permeant biarsenicals, FlAsH-EDT2 and ReAsH-EDT2 for fluorescent labeling of tetracysteine-tagged proteins », Nature protocols, vol. 3, no 9,‎ , p. 1527–1534 (ISSN 1754-2189, PMID 18772880, PMCID 2843588, DOI 10.1038/nprot.2008.144, lire en ligne, consulté le )
Ce document provient de « https://fr.wikipedia.org/w/index.php?title=Étiquette_(biologie)&oldid=183832423 ».